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小鼠血红蛋白补给生物测定法
A 仪器与试剂
A.a 比色计。
A.b 基础饲料
〔必要时可加抗生素〕。$$ $T成分/%$$葡萄糖·H2O/49.38$$不含维生素的酪蛋白/20.001$$无菌黄玉米粉/15.00$$明胶/5.00$$玉米油/5.00$$磷酸一钠/2.00$$碳酸钙/2.00$$氯化钾/0.50$$碘化食盐/0.50$$痕量矿物质预混合物〔见c〕/0.27$$氯化胆碱/0.15$$维生素预混合物〔见d〕/0.10$$dl-蛋氨酸/0.10$T
A.c 痕量矿物质预混合物:
$T矿物质@g/2kg痕量矿物质预混合物@g/100g维生素预混合物@g/kg基础饲料$$MgSO4,无水@1476.32@73.816@1.9819$$ZnSO4,7H2O@393.14@19.657@ 0.5278$$MnSO4,H2O@114.66@5.733@0.1539$$CuSO4,5H2O@14.63@0.7315@0.0196$$KIO3@1.25@0.0625@0.0017$T
A.d 维生素预混合物:
$T成分@g/2kg维生素预混合物@g/100g维生素预混合物@g/kg基础饲料$$维生素A,稳定的500,000IU/g@20.00@1.00@0.0100$$维生素D3,稳定的200,000IU/g@15.00@0.75@0.0075$$醋酸酯α-生育酚@100.00@5.00@0.0500$$甲萘醌@0.80@0.04@0.0004$$盐酸硫胺素@6.00@0.30$$0.0030$$核黄素@6.00@ 0.30@0.0030$$盐酸吡哆素@20.00@1.00@0.0100$$泛酸钙@20.00@1.00@0.0100$$烟酸@60.00@3.00@0.0300$$叶酸@2.00@0.10@0.0010$$明胶中的维生素B12 0.1%@40.00@2.00@0.0200$$蔗糖@1710.120@85.51@0.8551$T
A.e Drabkins溶液
溶解1g NaHCO3,52mgKCN及198mgK3Fe(CN)6于H2O中并稀释至1L。置棕色瓶中暗处贮藏。溶液在暗处是稳定的。当产生絮状物或沉淀时弃去。
B 血红蛋白测定
吸取5ml Drabkins溶液至几个比色计管中,向每个管加入小鼠尾静脉全血0.02ml用管中溶液洗涤吸管数次,颠倒混匀,留1管作空白,用以调节仪器的零点。放置10min。设定波长于540nm,用空白管调至100%T。用样品溶液取代空白读取%T值。用表24-6获得样品的浓度,以g血红蛋白/100ml血表示。
C 测定 |
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